生猪人工授精相关环节的技术要点探讨

李 盈郭 旭陈成思

（保亭黎族苗族自治县畜牧渔业服务中心，海南保亭 572300）

生猪人工授精可以提高良种公畜的种用价值和配种利用率，扩大受配母畜的头数，防止因种公猪带病而传播各类生殖系统疾病，但人工授精的应用效果也受到精液品质、母猪体况、发情周期等因素的影响，需要把握好精液采集、精液稀释、精液品质鉴定、背膘厚测定、同期发情、发情鉴定等各个环节的技术要点[1]。

1.1 采精前准备

采精前要对采精栏和假台畜进行清洗消毒，检查假台畜是否稳固，并根据公猪的大小调整假台畜的高度。集精杯干净无污染，且要先预热，内置过滤纸；
准备盆、高锰酸钾、生理盐水、抹布、纸巾等，方便清洗消毒。检查公猪健康状况以确保精液品质；
核对公猪栏号、耳号。采精员要求熟练掌握采精技巧，修剪指甲，清洗消毒手臂。

1.2 精液采集注意事项

1.2.1 种公猪发烧时不可采精

精子最适温度为18～25℃，公猪体温高于38℃，容易造成精子死亡[2]，因此，在公猪发烧时最好不采精。

1.2.2 初精应废弃

种公猪首先射出的精清部分，精子含量少，且含菌量大，一般不收集。当射出的精液呈乳白色时开始用集精杯收集。

1.2.3 手握法采精

采精过程中不要松手，否则压力减轻将会导致精液中断；
射精不完整会导致公猪生殖疾病。种公猪一般会分2～3次进行射精，每次都会射出部分凝胶，当有液滴样凝胶流出时，马上移开集精杯，以避免污染精液。

1.2.4 注意保存

采精完成后不要让精液接触阳光、高温、低温、自来水及其他可减弱精子活力的物质。精子常温保存温度为 18～25℃[3]。

2.1 精子活力检测

检测精子活力前，需打开恒温水浴锅、恒温操作台，并设置温度为37℃，精子需预热至37℃，在200倍显微镜下检测活力。采用“十级一分制”，只将作直线前进运动的精子列为有活力的精子，原地转圈运动、摆动、死亡的精子均为不合格的精子。精液中如有80%的精子作直线前进运动，精子活力计为80%，以此类推。常温保存的新鲜精液，精子活力应在0.7以上方可使用。

2.2 精子密度检测

2.2.1 精子密度测定仪检测

用移液枪吸取少量精液样品滴入检测片，确保检测片内缝隙全部吸入精液，无气泡残留；
把载有精液样品的检测片插入精子密度测定仪中进行测定，读取测定结果[4]。

2.2.2 血细胞计数法

吸取3%Nacl溶液（稀释并杀死精子）2 700 μL置于小试管中，再吸取300 μL摇匀的待测精液置于小试管中，上下混匀。从小试管中吸取20 μL稀释后的精液置于血细胞计数板血盖片的边缘，使稀释后的精液通过虹吸作用，渗入计数室内，无气泡产生。将血细胞计数板置于显微镜下，低倍镜下找到计数室，再用400倍高倍镜选取四角和中央共5个中方格计数。计数要以精子头部为准，遵循“上计下不计，左计右不计”的原则。

精子密度（个/mL）＝5个中方格的精子数目×5×10×1 000×10。

2.3 猪精液品质标准

猪精液品质标准和输精标准见表1和表2。

表1 猪的精液品质鉴定标准

表2 传统输精与深部输精法有效精子数对比

3.1 稀释倍数

在原精液精子活力合格（≥70%）的前提下，有3个因素决定精液的最终稀释倍数，分别为原精液的精子密度、用于输精的每份精液的总精子数和每份精液的体积。

3.2 精液稀释

将原精液从采精杯移入到已预热好的烧杯中，并从水浴锅中取出已预热好的稀释液，确保原精液与稀释液的温度相同或相差在1℃以内，将稀释液按照1∶1的比例沿烧杯壁缓慢加入到原精液中；
稀释完成后再次检测精液活力，保证精子活力合格（≥70%）。

3.3 精液稀释原则

等温稀释原则；
稀释液与原精液的温度要保持相同或相近（温差≤1℃）。稀释方向正确原则；
确保把稀释液加入到原精液中，而不能反向稀释。高倍稀释要分步进行，先低倍稀释再高倍稀释。第一次稀释完成后，稍等2～3 min再进行下次稀释，每次稀释倍数为1～2倍。

母猪批次化生产可实现全进全出，阻断猪群疾病的传播，有利于生产统筹管理，形成发情、配种、分娩联动，提高生产效率。批次化生产技术主要包括定时输精技术和分娩同期化技术，其中定时输精技术又包括发情周期、卵泡发育、发情鉴定、排卵和人工授精技术等5个方面的同期化。

4.1 批次化生产模式

生产批次数主要由母猪繁殖周期的长度和2个生产批次之间的间隔时间决定。母猪繁殖周期一般为140～147 d，包括妊娠期114 d，哺乳期21～28 d，断奶—配种间隔4～7 d。目前常用的批次化生产模式主要有周批次生产模式和非周批次生产模式。整周批次生产模式包括1周批次、2周批次、3周批次、4周批次等。非整周批次生产模式包括8 d批次、10 d批次、12 d批次等。

4.2 定时输精技术

4.2.1 发情周期同期化

母猪断奶后体内的催乳素分泌下降，发情周期逐渐恢复。为实现批次化管理，可以通过同一批哺乳母猪同时断奶，从而实现发情周期同期化。与经产母猪不同，后备母猪发情周期不统一，可通过注射或饲喂孕酮（烯丙孕素）进行同时化处理，剂量为20 mg/头/d，连续饲喂或注射18 d。烯丙孕素作为孕酮的一种，可以延长黄体期，推迟发情，从而实现同期发情。

4.2.2 卵泡发育同期化

卵泡发育同期化是定时输精的基础和前提。经产母猪在断奶后24 h，后备母猪在停喂烯丙孕素42 h后，注射孕马血清促性腺激素（PMSG）促进卵泡发育。后备母猪颈部肌肉注射PMSG 800 IU，初产母猪注射PMSG 1 000 IU，2胎以上经产母猪注射PMSG 800 IU可以实现卵泡发育同期化。

4.2.3 发情鉴定

在用PMSG促进卵泡发育同期化以后，一般3～7 d后会出现发情症状，在母猪口鼻处喷洒公猪气味剂，观察母猪发情表现，一般外部表现为外阴部充血红肿，有黏液流出，按压母猪背部胸腰结合处，若出现静立反应即可进行配种。静立反应表现为两耳后竖，尾巴翘起并轻轻颤动，母猪身体静立不动。

4.2.4 排卵同期化

为更好地实现定时输精，可以使用促性腺激素释放激素（GnRH）作为促排卵激素，促进卵泡成熟和集中排卵。经产母猪一般在颈部肌肉注射PMSG后72 h使用GnRH（剂量100 μg），后备母猪一般在注射PMSG后78 h注射GnRH（剂量100 μg）可实现排卵同时化，提高受精率[5]。

4.2.5 人工输精技术

在注射促排卵激素GnRH后24 h进行第1次人工输精，注射促排卵激素GnRH后40 h进行第2次人工输精。输精前，在每份精液中加入10 IU的缩宫素，上下摇匀后进行输精可以促进子宫和输卵管收缩，促进更多精子快速进入输卵管壶腹部，进一步提升母猪妊娠率。插入输精管时要斜向上45°插入，越过尿道口时再水平插入，如遇母猪努责，要暂停插入，待母猪努责结束再继续插入；
当插入约28～30 cm，感觉前进有阻力时，逆时针旋转输精管，使得子宫颈锁住输精管。传统输精要抬高输精瓶，不断按摩母猪，使精液缓慢流入子宫颈，不要挤压输精瓶，防止精液倒流[6]。子宫颈深部输精时，在插入外管后，停留1 min左右再插入内管，如遇阻力，稍作等待，切不可强行插入，防止对子宫壁造成损伤。深部输精可以将输精瓶内的精液挤压入母猪体内，节约输精时间，提升工作效率。

4.3 分娩同期化

母猪妊娠期平均为114 d。如果要实现批次化管理，就要通过前列腺素（注射氯前列醇钠0.2 mg）诱导分娩，使同一批妊娠母猪的分娩时间集中在114 d。大部分母猪在使用前列腺素氯前列醇钠36 h内完成分娩[7]，若未分娩，可在注射PGF2 α 24 h后注射缩宫素10 IU，可使母畜提早分娩，从而实现分娩同期化。

5.1 测定位置

背膘厚度是种猪选择的指标之一。一般在同批种猪体重达100±5 kg时测定，测定位置在母猪倒数3～4肋骨之间，距背中线5 cm处测定。从解剖学角度分析，猪背腰部共24～28个椎骨，其中包括14～17个胸椎、6～7个腰椎、4个荐椎。而倒数第3～4肋骨正好对应在第11～14胸椎处，恰好是背腰部椎骨的1/2处[8]。测定仪器一般选用兽用B超仪，探头为长方形马鞍状探头，探头长度为120 mm，探测深度为170 mm。

表3 不同批次对应的繁殖周期和哺乳期

5.2 背膘标准

母猪配种时的膘情为14～20 mm为宜，一般后备母猪初配日龄为210～230日龄，路鹏云等[9]表示杜洛克母猪的最佳初配日龄为260～300日龄。后备母猪配种理想体重为125～135 kg，后备母猪配种理想背膘为16～18 mm。母猪断奶理想背膘厚度为13～14 mm，母猪分娩前理想背膘厚度为17～19 mm。

当前生猪疾病风险较高，利用人工输精、批次化生产等技术可以节约生产成本，实现生猪生产的利润最大化。在采用定时人工输精和母猪分娩同期化技术时要掌握激素使用剂量和使用时间，正确开展精液品质鉴定，发挥种公猪和种母猪的最大遗传资源优势，提高受精率、妊娠率和分娩率，达到节本增效的目的。

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