中草药制剂对草鱼机体免疫力的影响

郭婷萍 赵常山 张志军

摘要：该试验研究不同剂量的复方中草药制剂对草鱼（Ctenopharyngodon idella）机体非特异免疫的影响。研究选择体重约5g的健康草鱼320尾，随机分成4组，每组80尾。各组草鱼依次饲喂在基础饵料添加0%、0.1%、0.2%、0.4%的复方中草药制剂的试验饵料。试验周期为8周，驯养1周。试验结束，采集各组草鱼血液，检测血清非特异性免疫指标。结果表明，与对照组比较，草鱼饵料中添加0.2%和0.4%的复方中草药制剂的草鱼血清中的溶菌酶活性显著提高了17.28%、19.8%（P<0.05）；
添加0.2%的复方中草药制剂使草鱼血清中碱性磷酸酶活性降低了14.02%，超氧化物歧化酶活性提高了34.19%（P<0.05）。研究表明，在草鱼养殖中使用0.2%和0.4%的复方中草药制剂可以增强草鱼机体的非特异性免疫力，综合各项数据考虑，复方中草药制剂最适添加量为0.2%。

关键词：复方中草药；
非特异性免疫；
草鱼（Ctenopharyngodon idella）

中图分类号：S965.112文献标志码：A

草鱼（Ctenopharyngodon idella）是中国主要淡水鱼养殖品种之一，具有生长快、营养价值高、耐粗饲等特点^[1-2]。但随草鱼养殖规模及养殖密度的增大，导致水质污染、病害频发，进而影响草鱼机体的免疫力及生产性能，致使养殖生产及经济效益受到影响^[3-4]。目前，饲料端禁抗政策实施以来，养殖行业寻找安全、高效的替抗产品迫在眉睫。近几年，中草药作为一种来源广泛、种类品种繁多、天然绿色的一种饲料添加剂在养殖行业逐渐推广应用^[5-6]。中草药既具有药理价值，也具有营养价值，具有双重作用，在养殖行业中的应用具有广泛的应用前景^[7]。部分研究发现，中草药在动物生产中具有很好的免疫调节作用。在奶牛生产中，使用54g/（d·头）的中草药提取物可以有效提高血清中免疫球蛋白和干扰素含量，降低促炎因子肿瘤坏死因子-α水平^[8]。在大菱鲆幼鱼生产中使用2%的中草药汤药，可以提高大菱鲆体内相关的非特异性免疫指标的数值（溶菌酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶）^[9]。蔡岩^[10]研究发现，中草药可以通过调节石斑鱼体内与免疫相关的通路及基因来改善石斑鱼机体的免疫功能。该试验中，以草鱼幼鱼为研究对象，探究不同剂量的复方中草药制剂对其机体非特异性免疫的影响，为中草药在草鱼养殖的高效推广与利用提供数据资料。

1 试验材料

1.1 中草药制剂

复方中草药制剂主要有五味子、山楂、甘草、党参、黄芪等组成，购自当地中药材大市场。以上中草药粉碎后过40目筛，按照等比例混匀，备用。

1.2 草鱼

试验草鱼购买于当地水产养殖公司，平均体重为5.0±0.2 g，体质健壮，无外伤。

1.3 免疫指标试剂盒

溶菌酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛等非特异性免疫指标检测试剂盒由南京建成生物工程研究所生产。

2 试验方法

2.1 试验分组及草鱼饵料

研究选择体重约5g的健康草鱼320尾，随机分成4组，每组80尾。各组草鱼依次饲喂在基础饵料添加0%、0.1%、0.2%、0.4%的复方中草药制剂的试验饵料。试验周期为8周，驯养1周。试验结束，采集各组草鱼血液，检测血清非特异性免疫指标。试验处理见表1。试验草鱼饵料配方见表2。

2.2 草鱼养殖管理

试验草鱼在进行正式试验之前，先使用基础饵料驯养1周，适应养殖环境。草鱼每日投喂3次（8：00、13：00、17：00），每天饵料投喂量约为草鱼体重的3.5%。养殖期间，不间断供氧，每3d换水一次，每次换水量约为1/3。水温约27.5℃左右，pH值约7.5左右，氨氮含量低于0.18mg/L，溶解氧含量大于5.5mg/L。

2.3 免疫指标检测方法

试验结束当天，所有草鱼禁食12hrs，之后每组挑选8尾草鱼，采集血液，经离心后收集血清用于溶菌酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛等非特异性免疫指标的測定。

3 试验结果

不同剂量的复方中草药制剂对草鱼免疫指标的影响见表3，与对照组比较，草鱼饵料中添加0.2%和0.4%的复方中草药制剂的草鱼血清中的溶菌酶活性显著提高了17.28%、19.8%（P<0.05）；
添加0.2%的复方中草药制剂使草鱼血清中碱性磷酸酶活性降低了14.02%（P<0.05）；
添加0.2%的复方中草药制剂使草鱼血清中的超氧化物歧化酶活性提高了34.19%（P<0.05）；
而复方中草药制剂对草鱼血清中的过氧化氢酶和丙二醛含量未产生显著性影响。研究表明，在草鱼养殖中使用0.2%和0.4%的复方中草药制剂可以增强草鱼机体的非特异性免疫力，综合各项数据考虑，复方中草药制剂最适添加量为0.2%。

4 讨论

溶菌酶是动物机体内非特异性免疫因子，可以抵御养殖过程中病害对机体的危害；
碱性磷酸酶是一种比较重要的生化指标；
超氧化物歧化酶和过氧化氢酶是机体内重要的抗氧化酶，具有清除机体内多余自由基的功能；
丙二醛是脂质氧化产生的物质，可以预示机体的氧化程度。以上指标在鱼类机体非特异性免疫功能方面起着重要的作用。本试验中，与对照组比较，草鱼饵料中添加0.2%和0.4%的复方中草药制剂的草鱼血清中的溶菌酶活性显著提高了17.28%、19.8%；
添加0.2%的复方中草药制剂使草鱼血清中碱性磷酸酶活性降低了14.02%，超氧化物歧化酶活性提高了34.19%，表明在草鱼养殖中使用0.2%和0.4%的复方中草药制剂可以增强草鱼机体的非特异性免疫力，综合各项数据考虑，复方中草药制剂最适添加量为0.2%。郑善坚等^[11]研究发现，在草鱼生产中添加1%的复方中草药可以提高草鱼机体的超氧化物歧化酶水平，增加了MHCⅠ免疫基因的表达。邢玉娟等^[12]研究表明，在草鱼养殖中使用适量的复方中草药可以提高草鱼体内白细胞的吞噬能力，增强了超氧化物歧化酶活性及溶菌酶活性。以上研究均表明，草鱼养殖中使用适量的中草药可以增强机体的非特异性免疫功能，主要是因为中草药中的各种活性成分具有调节机体免疫的功能。

5 结论

该试验研究表明，在草鱼养殖中使用适量的复方中草药制剂可以增强草鱼血清中超氧化物歧化酶、溶菌酶活性，降低碱性磷酸酶活性，增强了机体的非特异性免疫力，综合各项数据考虑，复方中草药制剂最适添加量为0.2%。

参考文献：

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[2]李忠莹，丁红秀，张露，等.不同生境来源的草鱼肌肉营养品质比较[J].食品与发酵工业，2021，47（17）：133-139.

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[5]刘映雪.中草药饲料添加剂在减抗形势中的应用[J].今日畜牧兽医，2022，38（08）：61+64.

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[11]郑善坚，胡金春，葉霆，等.一种复方中草药制剂对草鱼非特异性免疫机能的影响[J].浙江农业科学，2022，63（01）：151-153.

[12]邢玉娟，程安达，吕慧源，等.一种复合中草药对草鱼非特异性免疫功能的影响[J].山东农业大学学报（自然科学版），2018，49（05）：782-786.

Effect of herbal preparations on the immunity of Ctenopharyngodon idella organism

GUO Tingping， ZHAO Changshan， ZHANG Zhijun

（Zhongwei City Shapotou District Animal Husbandry and Aquatic Technology Extension Service Center， Zhongwei 755000， Ningxia China）

Abstract：This experiment investigated the effect of different doses of compound herbal preparations on the non-specific immunity of grass carp （Ctenopharyngodon idella） organism. The study selected 320 healthy grass carp weighing about 5g and randomly divided into 4 groups of 80 fish each. Each group was fed in turn a test bait with 0%， 0.1%， 0.2% and 0.4% of a compound herbal preparation added to the basal bait. The test period was 8 weeks， with 1 week of domestication. At the end of the test， blood was collected from each group of grass carp and serum non-specific immune indexes were tested. The results showed that compared with the control group， the lysozyme activity in the serum of grass carp baits supplemented with 0.2% and 0.4% of the compound herbal preparation significantly increased by 17.28% and 19.8% （P<0.05）; the addition of 0.2% of the compound herbal preparation reduced the alkaline phosphatase activity in the serum of grass carp by 14.02% and increased the superoxide dismutase activity by 34.19% （P<0.05）. The study showed that the use of 0.2% and 0.4% of the compound herbal preparations in grass carp culture could enhance the non-specific immunity of the grass carp organism， and considering all the data， the optimum amount of the compound herbal preparations was 0.2%.

Keywords：Compound herbal medicine; Non-specific immunity; Grass carp （Ctenopharyngodon idella）

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